湖南指甲在str-dna亲子鉴定研究
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指甲在str-dna亲子鉴定研究

发表日期:2012-11-26 来源:湖南雅湘亲子鉴定咨询中心

北京市公安局法医检验鉴定中心

目的 研究尸体所处环境、指甲DNA提取部位及提取方法对STR分型的影响。方法对案件中不『司条
件腐败尸体指甲,使用不同部位、不同体系和时间消化,酚。氯仿法提取指甲核DNA,进行PCR扩增及STR分型。
结果提取指甲甲体、甲根部位均可获得STR分型。结论指甲是法医检案中一类具有实用价值的检材。

在法医日常检案中,当腐败尸体的心血、肌肉等组织无法检出STR结果时,拔取其指甲进行STR分
型往往得到满意的效果⋯。本文作者拔取腐败尸体指甲,分不同部位用不同消化体系和时间提取DNA
并进行STR分型,探讨指甲不同部位、不同消化体系和时间等因素对STR分型结果的影响。

样本收集
腐败尸体的指甲,来源于6--9月间发生的17具案件尸体。男性尸体13具,女性4具;死亡时间3d
--2月;
1.2方法
将拔取的指甲放人装有纯净水的试管中,置于翻转播床冲洗至冲洗液澄清为止;剪碎洗净的指甲,放
入1.5rrd离心管内,加入TES 256>1、10%SDS 80t4、10rng/ml P.K 321d和1tool/L DTT 32td,37℃消化;酚.氯仿法提取DNA,2.5倍无水乙醇沉淀,晾干后301*1蒸馏水溶解。取2pIDNA提取液,1%EB-琼脂糖凝胶电泳,取1>IDNA,按Amp F1 STR ProfilerPlus⋯试剂盒(ABI公司)或Power Plex一16试剂盒
(Promega公司)方法进行复合扩增,于ABI 310、3100型电泳分析仪进行分离。
1.2.1指甲不同部位甲片的DNA提取拔取的指甲分3片,即甲体前部和后部、甲根,每片剪取2×2mm大小,按卜-述方法操作。
1.2.2不同消化时间甲片的DNA提取取4×4ram的甲体后部甲片,等分4份,分别消化1h、3h、6h、
10h,按上述方法操作。
1.2.3不同消化体系的甲片的DNA提取甲片等分后剪碎,分别用体系A(TES溶液256/*l,10%SDS
80m,10rag/m[P.K 32td,lmol/LⅣ盯32>1),体系B(TES 400p1,10%SDS 401d,10mg/ml P.K 32“1.1mol/L D1vr 161.1)37℃消化lh后,按上述方法操作。
2结果
本组17具腐败尸体的指甲,16例得到满意的STR图谱,l例土埋尸体的指甲末获满意结果。甲根和甲体后部可得到满意的STR分型,甲体前部STR分型,其峰高小于100相对荧光单位(图1)。甲体后部4组不同消化时间提取的模板都获得了可读的分型图谱,消化1h的峰高较其他模板低,相对荧光单位为1083;3h、6h、10h的模板扩增后,其相对荧光单位分别为1398,1676,1178(图2)。消化相同部位指甲,使甲片完全消化,体系A比体系B耗时少,两体系均可得到STR分型结果。
讨论
本实验拔取的17具腐败尸体指甲,16例得到满意的STR分型图谱。1具土埋尸体未能进行STR分
型,可能与指甲的保存环境有关。对于较新鲜的检材,消化1h即能得到良好结果。对腐败时问较长的指甲,建议延长消化时间至6h以上,最大限度提高检材利用率。指甲内富含二硫键_2 J,在消化体系中加入D1T.有助于破坏细胞连接,使细胞充分被蛋白酶K消化。在37℃时,DTI"与蛋白酶K都处于最大活性状态,利于消化。应用低浓度体系(体系B)消化,由于有效成份浓度低,短时间内消化效率不及体系A。从指甲中提取DNA进行STR检验,检材提取方便且不破坏尸体外观;指甲中钙含量较骨骼少,对扩增过程的抑制作用小;试剂价格低,耗时少。即便使用这种方法未扩增出STR结果,提取物仍可用于mtDNA的检验。综L所述,提取指甲DNA可用于腐败尸体的核DNA检验。

本所开展指甲DNA亲子鉴定服务 收费为每样本加1000元


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